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常用組織切片機(jī)切片的方法

閱讀:2215      發(fā)布時(shí)間:2013-7-31
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冰凍切片 是免疫組織化學(xué)染色中常用的一種切片方法。其突出的優(yōu)點(diǎn)是能夠較完好地保存多種抗原的免疫活性,尤其是細(xì)胞表面抗原更應(yīng) 采用冰凍切片。新鮮的組織及已固定的組織均可作冰凍切片。
冰凍時(shí),組織中水份易形成冰晶,往往影響抗原定位。一般認(rèn)為冰晶少而大時(shí),影響較小,冰晶小而多時(shí),對(duì)組織結(jié)構(gòu)損害較大,在含水量較多的組織中上述現(xiàn)象更易發(fā)生。冰晶的大小與其生長(zhǎng)速率成正比,而與成核率(形成速率)成反比,即冰晶形成的數(shù)量愈多則愈小,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響愈嚴(yán)重。因此,應(yīng)盡量降低冰晶的數(shù)量。Fish認(rèn)為冰凍開(kāi)始時(shí),冰晶成核率較慢,以后逐漸增加,其臨界溫度為-33。C, 從-30。C降-43。C之間,成核率急劇增加達(dá)1018,然后再減慢?;谏鲜隼碚摽刹扇∫韵麓胧p少冰晶的形成。

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