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ELISA實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制問題

2012-11-10  閱讀(1747)

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從1949年美國(guó)College of American Pathologists(簡(jiǎn)稱CAP)首先開始研究臨床實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制(簡(jiǎn)稱質(zhì)控)問題,美國(guó)學(xué)者Levery和Jenning于1950年發(fā)表*篇關(guān)于使用質(zhì)控圖的實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控,臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的室內(nèi)質(zhì)控工作正式拉序幕。
 
到70年代,實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制進(jìn)入一個(gè)新的階段--全面質(zhì)量管理,推行GoodLaboratory Parctice(簡(jiǎn)稱GLP)。進(jìn)入80年代末期,GLP的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)生了,發(fā)展到"認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室"管理階段。全面質(zhì)量管理的宗旨在于預(yù)防差錯(cuò)的產(chǎn)生。質(zhì)控圖的統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)控的目的是檢出差錯(cuò)。統(tǒng)計(jì)學(xué)的實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控是全面質(zhì)量管理中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。
 
本章節(jié)主要介紹免疫學(xué)檢驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)室內(nèi)質(zhì)控方法。因?yàn)镋LISA是目前臨床上zui常用的一種免疫學(xué)檢驗(yàn)方法,就以ELISA檢驗(yàn)為例,介紹一下有關(guān)問題。

衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心免疫質(zhì)控室從1988年開始在全國(guó)范圍內(nèi)開展乙肝標(biāo)志物檢驗(yàn)的質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng),一直采用這一套質(zhì)量評(píng)價(jià)方法,并在實(shí)踐中不斷實(shí)踐、提高和完善,希望能找出一條適合中國(guó)國(guó)情的,行之有效的質(zhì)量管理的道路。

1 、基本概念
1.1 、質(zhì)量控制(Quaility Control,Q.C)
質(zhì)量控制是監(jiān)視全過程,排除誤差,防止變化,維持標(biāo)準(zhǔn)化現(xiàn)狀的一個(gè)管理過程。這一過程是通過一個(gè)反饋環(huán)路進(jìn)行的。
1)確定控制的對(duì)象;
2)規(guī)定控制對(duì)象的標(biāo)準(zhǔn)(預(yù)期值);
3)制定或選擇控制方法和手段;
3)測(cè)量實(shí)際數(shù)據(jù);
4)比較或較對(duì)實(shí)際數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的差異,并說明產(chǎn)生這一差異的原因。超出預(yù)
定誤差范圍,報(bào)警系發(fā)出信號(hào),反饋通道中斷。
5)采取行動(dòng),解決差異?;謴?fù)原狀(原標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài))的手段發(fā)揮作用。
 
質(zhì)量控制主要采用質(zhì)控圖進(jìn)行。質(zhì)控圖是把某一檢驗(yàn)的性能數(shù)據(jù)與所計(jì)算出來的預(yù)期的"控制限"進(jìn)行比較的圖。這種性能數(shù)據(jù)是在按規(guī)程正常進(jìn)行時(shí),按時(shí)間順序而抽選出來的,其目的是檢測(cè)檢驗(yàn)過程中變異的"可追查"性原因。"可追逆"性的誤差原因,是指除去隨機(jī)誤差以外的其他原因。"控制限"是通過統(tǒng)計(jì)計(jì)算出來的,在后我們將詳細(xì)介紹(見
3、室內(nèi)質(zhì)控程序)。

1.2 、誤差
實(shí)驗(yàn)誤差分為三種:系統(tǒng)誤差、隨機(jī)誤差和過失誤差。
 
系統(tǒng)誤差是指一系列測(cè)定結(jié)果與真值或靶值存在有同一傾向的誤差,有明顯的規(guī)律性,可在一定條件下重復(fù)出現(xiàn),是可以通過質(zhì)控預(yù)防和校正的。
 
隨機(jī)誤差又稱偶然誤差,是一種偶然的、未能預(yù)料到的誤差,是難以避免和校正的誤差。檢驗(yàn)工作中隨機(jī)誤差的分布符合正態(tài)分布規(guī)律。
 
過失誤差是人為的責(zé)任誤差。通過加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理和開展質(zhì)量控制工作是可以避免的。
 
1.3 、正態(tài)分布及標(biāo)準(zhǔn)差
ELISA試驗(yàn)中,檢驗(yàn)同一樣本達(dá)20次以上時(shí),就會(huì)發(fā)現(xiàn)這組數(shù)據(jù)(指測(cè)定結(jié)果的吸光值)分布在均值兩側(cè),大部分集中在均值附近。如果以測(cè)定值為橫坐標(biāo),以出現(xiàn)的頻率為縱坐標(biāo)作圖,就可繪出一個(gè)呈鐘形的曲線圖。如圖5-1,鐘頂處為均值,其他值以均值為中心對(duì)稱分布,這就是正態(tài)分布。
 
正態(tài)曲線以下的面積稱概率,常用樣本的均數(shù)(X)和標(biāo)準(zhǔn)差(SD)來表示,其計(jì)算方法如下:
均值、標(biāo)準(zhǔn)差和概率的關(guān)系如下:
X±1SD,概率0.68    X±2SD,概率0.95    X±3SD,概率0.99
 
換言之,當(dāng)ELSIA檢測(cè)同一樣本達(dá)一定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù),其中靠近均值(X)的±1SD范圍內(nèi)的數(shù)據(jù),占該組數(shù)據(jù)的68%,在X±2SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的95%,在X±3SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的99%。當(dāng)我們要求檢驗(yàn)結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合格時(shí),將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。
 
1.4 、真值
用確切的、的決定性方法測(cè)得的值,稱為真值。真值一般是測(cè)不到的。通過可靠的決定性方法測(cè)出的值,稱為靶值,通常用靶值來表示真值的大小。
 
1.5 、準(zhǔn)確度(accuracy)
是指測(cè)定結(jié)果與真值(或靶值)接近的程度。準(zhǔn)確度不能以數(shù)字表示,往往用不準(zhǔn)確度來衡量。測(cè)定結(jié)果與靶值的偏離程度稱為偏差,它表示該項(xiàng)檢驗(yàn)的不準(zhǔn)確度。
 
偏差=檢驗(yàn)的均值-真值(或靶值)
相對(duì)偏差=偏差真值÷(或靶值)×100%
 
1.6 、精密度(Precision)
是指對(duì)同一樣本重復(fù)測(cè)定時(shí),每次測(cè)定結(jié)果與平均值的接近程度,即重復(fù)測(cè)定值之間的符合程度。
 
1.7、 標(biāo)準(zhǔn)品
1)標(biāo)準(zhǔn)品 由WHO或相應(yīng)組織標(biāo)定的,用肯定的、*的、準(zhǔn)確的物理或化學(xué)方法測(cè)定的定值材料。
2)生物學(xué)活性標(biāo)準(zhǔn)品根據(jù)生物學(xué)反應(yīng)由WHO或相應(yīng)組織標(biāo)定的活性單位的材料。
3)參考標(biāo)準(zhǔn)血清 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化組織根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)的法定材料??捎糜阼b定儀器和鑒定方法準(zhǔn)確性。
 
1.8、 臨床決定性水平(clinical decision leuel)
當(dāng)某個(gè)被測(cè)物的濃度達(dá)到某一水平時(shí),臨床醫(yī)師必須采用醫(yī)療措施。被測(cè)物的這濃度稱為臨床決定性水平。
 

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