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液相色譜柱的應(yīng)用及保存

閱讀:1711      發(fā)布時(shí)間:2023-9-19
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  液相色譜是一種廣泛應(yīng)用于生物、化學(xué)、環(huán)境等領(lǐng)域的分離技術(shù),其原理是利用柱填料對混合物進(jìn)行分離,通過不同成分在柱填料中的分配系數(shù)(K值)的差異實(shí)現(xiàn)分離。作為液相色譜系統(tǒng)的核心組件,液相色譜柱可直接影響到樣品分離效果和分離速率,是液相色譜分離的關(guān)鍵組成部分之一。
 
  色譜柱在使用前,*好進(jìn)行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測試所使用的條件是**條件),只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。
 
  液相色譜柱的儲(chǔ)存液無特殊說明,均為評價(jià)報(bào)告所示的流動(dòng)相。在使用前,一定要注意液相色譜柱的儲(chǔ)存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應(yīng)先用10%左右的低濃度的有機(jī)相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機(jī)相中很容易析出,堵塞色譜柱。
 
  色譜柱的保存
 
  (1)反相液相色譜柱色譜柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng):
 
  使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相,實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。
 
  (2)長期保存色譜柱:
 
  如色譜柱要長時(shí)間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲(chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲(chǔ)存于水(含防腐劑****或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上。儲(chǔ)存的溫度*好是室溫。

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