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東曹(上海)生物科技有限公司

親水色譜柱的使用可少不了如下要點(diǎn)

時(shí)間:2023-4-19 閱讀:1287
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  親水色譜屬于Z常用的HILIC色譜柱之一,可以非常迅速并有效地分離糖類(lèi)、多肽、以及低分子量的極性藥物。尤其在針對(duì)低聚糖的分析上具優(yōu)勢(shì),TSKgelAmide-80色譜柱現(xiàn)已成為低聚糖分離的標(biāo)準(zhǔn)。
  親水色譜柱在用于分離疏水性化合物與常規(guī)的C18相具有相似的選擇性,所以也可以作為一種通用C18柱使用。是專(zhuān)為親水性和極性化合物具有更強(qiáng)的保留能力和選擇性而設(shè)計(jì)的。典型的應(yīng)用是對(duì)生物分子、代謝物和藥物降解產(chǎn)物如有機(jī)酸、水溶性維生素、低聚糖、氨基酸以及小分子縮氨酸和小分子核苷等進(jìn)行分離。相呈現(xiàn)穩(wěn)定的基線(xiàn)、高選擇性和長(zhǎng)保留時(shí)間,甚至在中性pH值條件下和沒(méi)有緩沖溶液或反離子添加劑條件下使用。
  親水色譜柱的注意事項(xiàng):
  1、柱子的存儲(chǔ):對(duì)水分非常敏感,因此在存儲(chǔ)柱子時(shí)應(yīng)避免潮濕和高溫。
  2、樣品的制備:由于親水性固定相與極性樣品有很強(qiáng)的相互作用,因此,樣品中必須去除非極性物質(zhì),例如脂類(lèi)和疏水物質(zhì)等。
  3、流動(dòng)相的選擇:選擇合適的流動(dòng)相可以提高柱子的穩(wěn)定性和分離效果。通常使用含有一定濃度的鹽類(lèi)或有機(jī)溶劑混合物作為流動(dòng)相。
  4、pH值的調(diào)節(jié):在某些情況下,調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值可以提高柱子的穩(wěn)定性和分離效率。
  5、注射量的控制:過(guò)多的樣品注射量會(huì)降低柱子的壽命和分離效率。
  6、清洗柱子:使用正確的清洗方法可以延長(zhǎng)柱子使用壽命。
總之,親水色譜柱是一種強(qiáng)大的分離技術(shù),可用于分離多種生物大分子和化合物。通過(guò)選擇不同的官能團(tuán)和調(diào)整操作參數(shù),可以實(shí)現(xiàn)對(duì)分子的高效分離和純化。在生命科學(xué)、化學(xué)和藥物研究等領(lǐng)域中,是一種*分離工具。 

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