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公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品分類：蛋白電泳

儲存條件：4℃,12個月

用途：配制Tris非變性連續(xù)PAGE凝膠

注意事項：主要由Tris-HCl、甘油、溴酚藍組成。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

巨大芽孢桿菌原鈣粘蛋白γA11抗體Anti-CCN3 AntibodyC反應蛋白(CRP)

堅強芽孢桿菌原鈣粘蛋白γA12抗體Anti-CCNA1 AntibodyC多肽(CP)

黑色附球霉原鈣粘蛋白β12抗體Anti-CCNA2 Antibody(PB0402)CXC趨化因子受體7(CXCR7)

塔賓曲霉原鈣粘蛋白β3抗體Anti-CCNB1 AntibodyCXC趨化因子受體4(CXCR4)

朱黃籃狀菌原鈣粘蛋白γB1抗體Anti-CCNA1 AntibodyCXC趨化因子受體3(CXCR3)

大腸埃希菌原鈣粘蛋白γB2抗體Anti-CCNB1 AntibodyCXC趨化因子受體1(CXCR1)

腸桿菌屬原鈣粘蛋白γB4抗體Anti-CCNB1 Antibody(PB0130)CXC趨化因子配體16(CXCL16)

香菇原鈣粘蛋白γB6抗體Anti-CCNB2 AntibodyCX3C趨化因子受體1(CX3CR1)

膠孢鐮孢原鈣粘蛋白γC3抗體Anti-CCNB2 AntibodyCOP9結構光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2(擬南芥)(COPS2)

芥黃蜜環(huán)菌原鈣粘蛋白γC4抗體Anti-CCNB1 Antibodyc-myc癌基因產物(c-myc)

山茶磷蛋白聚糖PTPRZ抗體Anti-CCND2 Antibodyc-Jun基末端激/應急激活的蛋白(JNK/SAPK)

桿狀毛霉神經特異蛋白酪磷N5抗體Anti-CCND1 AntibodyCDCP1(CDCP1)

豬瘟病間接免疫熒光足表達蛋白/轉錄因子21抗體Anti-CCND3 Antibody(PB0131)CD8分子(CD8)

Bacillus tequilensis孕激受體抗體Anti-CCND1 AntibodyCD82分子(CD82)

枯草芽孢桿菌神經突觸蛋白PCLO抗體Anti-CCND1 AntibodyCD73分子(CD73)

諾爾氏菌早老γ分泌2抗體Anti-CCP110 AntibodyCD6分子(CD6)

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規(guī)格：0.98

: AS1.166M010資源名稱: 苜蓿根瘤菌 質量規(guī)格：0.99

小刺青霉Penicillium│spinulosum 質量規(guī)格：0.98
Tris-甘油加樣緩沖液ACD/PTOP/FITC  熒光su標記腎上腺皮質發(fā)育異常蛋白IgG規(guī)格： 0.2ml

ACE1/FITC  熒光su標記血管緊張su轉換meiIgG規(guī)格： 0.2ml

ACE2/FITC  熒光su標記血管緊張su轉換mei2IgG規(guī)格： 0.2ml

ACEI/FITC  熒光su標記血管緊張su1轉換mei抑制劑IgG規(guī)格： 0.2ml

Acetyl CoA Carboxylase/FITC  熒光su標記兔抗人、大、小鼠、猴、牛乙酰輔meiA羧化meiIgG規(guī)格： 0.2ml

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。