Tris-硼酸電泳粉劑公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：Anti-OR89 Antibody大鼠糖原合成酶激酶
Anti-OR8B2 Antibody人活化素A
Anti-OR8B4 Antibody人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1
Anti-OR8B2 Antibody大鼠CXC趨化因子配體16
Anti-OR89 Antibody小鼠可溶性CD30配體
Anti-OR8G1 Antibody大鼠高敏狀腺原
Anti-OR8

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢(xún)并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類(lèi)：核酸電泳

儲(chǔ)存條件：室溫,24個(gè)月

用途：電泳緩沖液,常用于DNA凝膠電泳

注意事項(xiàng)：主要由Tris、硼酸、EDTA、DEPC處理水組成。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn)，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

褶緣黑點(diǎn)口蘑整合β6/Integrin β6抗體Human RSK3 ELISA Kit魚(yú)胰島受體(ISR)免疫試劑盒

擬青霉磷肌磷蛋白INPP5抗體Human RSL24D1 ELISA Kit魚(yú)胰島(INS)免疫試劑盒

釀酒酵母白介4誘導(dǎo)蛋白1抗體Human RRP9 ELISA Kit魚(yú)血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)免疫試劑盒

苛求芽孢桿菌分化相關(guān)基因2蛋白/立即早期反應(yīng)蛋白抗體Human RTF1 ELISA Kit魚(yú)雄烯二(ASD)免疫試劑盒

長(zhǎng)柄鏈格孢間粘附分子4抗體Human RRS1 ELISA Kit魚(yú)色C氧化(COX)免疫試劑盒

冷溫木克酵母整聯(lián)蛋白重復(fù)蛋白3抗體Human RSK2 ELISA Kit魚(yú)脫氫表雄(DHEA)免疫試劑盒

泗川假黃單胞菌胰島樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體Human RSF1 ELISA Kit魚(yú)褪黑(MT)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌胰島樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2抗體Human RARB(Retinoic acid receptor beta) ELISA Kit魚(yú)透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌磷化整合β4抗體Human RSK3 ELISA Kit魚(yú)嗜性粒過(guò)氧化物(EPX)免疫試劑盒

植物乳桿菌胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1抗體Human RSL24D1 ELISA Kit魚(yú)生長(zhǎng)激(GH)免疫試劑盒

炭球菌胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4抗體Human RSPH3 ELISA Kit魚(yú)腎上腺髓質(zhì)(ADM)免疫試劑盒

固氮假單胞菌整合α7抗體Human RSK2 ELISA Kit魚(yú)腎上腺(EPI)免疫試劑盒

釀酒酵母白介7抗體Human RSPH9 ELISA Kit魚(yú)神經(jīng)肽Y(NPY)免疫試劑盒

地衣芽孢桿菌白介6受體α/IL-6Rα抗體Human RSL24D1 ELISA Kit魚(yú)溶菌(腎淀粉樣變)(LZM)免疫試劑盒

糞產(chǎn)堿桿菌白介9抗體Human RSK3 ELISA Kit魚(yú)熱休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)*整合αL抗體Integrin αLHuman RARB(Retinoic acid receptor beta) ELISA Kit魚(yú)熱休克蛋白90(HSP-90)免疫試劑盒

蒲青霉Penicillium│lilacinum 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%L-4-羥基異亮

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2%草烏

細(xì)腳棒束孢Isaria│tenuipes 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2%圣草
Tris-硼酸電泳粉劑MMP- ELISA kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白mei規(guī)格： 48T

MMP-13 ELISA kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白mei13規(guī)格： 48T

MMP-3 ELISA kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白mei3規(guī)格： 48T

MMP-7 ELISA kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白mei7規(guī)格： 48T

MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白mei2/明膠meiA規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線(xiàn)的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀(guān)察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。