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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/48樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | AS63211 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 檢測(cè)方法 | 微量法 |
詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用：
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 輔酶ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒100管/48樣 | 微量法 | 100管/48樣 | AS63211 |
商品介紹：
商品介紹 測(cè)定意義 輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要?dú)涫荏w，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時(shí)，形成大量的ROS，同時(shí)NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過(guò)這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說(shuō)明細(xì)胞呼吸耗氧量較高，處于過(guò)氧化狀態(tài)。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外，NAD+降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。 測(cè)定原理 分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過(guò)PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測(cè)吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進(jìn)一步采用MTT還原法檢測(cè)。 需自備的儀器和用品 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
常見(jiàn)樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備： 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液） ，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：雙試劑，直接操作，快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微：需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高：檢測(cè)線0.5U/ml，是羥胺法5倍，鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好：批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%，試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn)： X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng)，不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)試盒100管/48樣 輔酶Ⅰ系列
乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)試盒50管/24樣 輔酶Ⅰ系列
NAD蘋果酸脫氫酶（NADMDH）測(cè)試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
NAD蘋果酸脫氫酶（NADMDH）測(cè)試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
NADP蘋果酸脫氫酶（NADPMDH）測(cè)試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
NADP蘋果酸脫氫酶（NADPMDH）測(cè)試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶測(cè)試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶測(cè)試盒25管/24樣 輔酶Ⅰ系列
NADH氧化酶（NOX）測(cè)試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
NADH氧化酶（NOX）測(cè)試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
檸檬酸合酶(CS）測(cè)試盒100管/48樣 輔酶Ⅰ系列
檸檬酸合酶(CS）測(cè)試盒50管/24樣 輔酶Ⅰ系列
檸檬酸合酶(CS）測(cè)試盒25管/12樣 輔酶Ⅰ系列
丙酮酸脫羧酶（PDC）測(cè)試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
丙酮酸脫羧酶（PDC）測(cè)試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
乙醇含量測(cè)試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
乙醇含量測(cè)試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
乙醇脫氫酶（ADH）測(cè)試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
乙醇脫氫酶（ADH）測(cè)試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測(cè)試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測(cè)試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
甲醛脫氫酶（FDH）測(cè)試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
甲醛脫氫酶（FDH）測(cè)試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
乙醛脫氫酶（ALDH）測(cè)試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
乙醛脫氫酶（ALDH）測(cè)試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒100管/48樣 輔酶Ⅱ系列
輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒50管/24樣 輔酶Ⅱ系列
輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒100管/48樣 輔酶Ⅱ系列
Rat Ficolin-2酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Ficolin-2 ELISA Kit
Ractopamine酶聯(lián)免疫試劑盒 Ractopamine ELISA Kit
Quinolones酶聯(lián)免疫試劑盒 Quinolones ELISA Kit
Pig Ficolin-2酶聯(lián)免疫試劑盒 Pig Ficolin-2 ELISA Kit
Phenylbutazone酶聯(lián)免疫試劑盒 Phenylbutazone ELISA Kit
Mouse Ficolin-2酶聯(lián)免疫試劑盒 Mouse Ficolin-2 ELISA Kit
Human Heat shock protein beta-6酶聯(lián)免疫試劑盒 Human Heat shock protein beta-6 ELISA Kit
Human cleaved microtubule-associated protein tau酶聯(lián)免疫試劑盒 Human cleaved microtubule-associated protein tau ELISA Kit
Corticosteroid酶聯(lián)免疫試劑盒 Corticosteroid ELISA Kit
Clenbuterol酶聯(lián)免疫試劑盒 Clenbuterol ELISA Kit
Chloramphenicol酶聯(lián)免疫試劑盒 Chloramphenicol ELISA Kit
Bovine Ficolin-2酶聯(lián)免疫試劑盒 Bovine Ficolin-2 ELISA Kit
Boldenone酶聯(lián)免疫試劑盒 Boldenone ELISA Kit
Beta Lactams酶聯(lián)免疫試劑盒 Beta Lactams ELISA Kit
輔酶ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒100管/48樣Beta Agonists酶聯(lián)免疫試劑盒 Beta Agonists ELISA Kit
19-Nortestosterone酶聯(lián)免疫試劑盒 19-Nortestosterone ELISA Kit
斑馬魚胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)ELISA試劑盒
斑馬魚胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)ELISA檢測(cè)試劑盒
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
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