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技術(shù)文章

魚促卵泡素(FSH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用

閱讀:155          發(fā)布時間:2016-4-11

魚促卵泡素(FSH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用
使用目的:
本試劑盒用于測定魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促卵泡素(FSH)含量。ELISA試劑盒
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中魚促卵泡素(FSH)。用純化的魚促卵泡素(FSH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促卵泡素(FSH),再與 HRP標(biāo)記的促卵泡素(FSH)抗體    ,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促卵泡(FSH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在  450nm  波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中魚促卵泡素(FSH)濃度。
標(biāo)本要
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過(HRP)活性。
操作步驟
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
2.  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl
操作程序總:
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo), OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與  OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù), 即為樣品的實(shí)際濃度。
魚促卵泡素(FSH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本  OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
魚促卵泡素(FSH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月

LNK    淋巴細(xì)胞特異性接頭蛋白抗體
LILRB2    細(xì)胞表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子4抗體
LY6G6F    淋巴細(xì)胞抗原6重復(fù)位點(diǎn)蛋白G6F抗體
Leupaxin    樁蛋白抗體
LRPAP1    脂蛋白受體相關(guān)蛋白/低密度脂蛋白相關(guān)蛋白的相關(guān)蛋白1抗體
LEPREL2    皮屑樣蛋白2抗體
LAMA3    層粘蛋白α3抗體
LAMP1    溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體
Lxn/Latexin    羧肽酶抑制劑抗體
LCAT    卵磷酯膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶抗體
LPL/PLASTIN2    脂蛋白脂酶抗體
Leptin receptor    瘦素受體抗體
LRP6    低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體
Phospho-LRP6 (Ser1490)    磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體
Phospho-LATS1 (Thr1079)    磷酸化腫瘤抑制基因LATS1抗體
LRRK2    富亮氨酸重復(fù)激酶2抗體
LRP    肺耐藥相關(guān)蛋白抗體
LRCH3    富含亮氨酸重復(fù)家庭蛋白3抗體

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