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上海源葉生物科技有限公司
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抗環(huán)胍氨酸肽抗體
2011-8-31 閱讀(973)
（一）研究簡史
抗環(huán)胍氨酸肽抗體（CCP）抗體ELISA法是1998年Schellkens等建立起來輔助診斷RA的檢測方法，該技術(shù)一出現(xiàn)，立即備受關(guān)注，現(xiàn)已有商品供應(yīng)。按照前絲集蛋白cDNA序列，人工合成可能具有抗原表位的9—19個氨基酸短肽，并經(jīng)胍氨酸化修飾，經(jīng)ELISA篩選出具有抗原性片段。
（二）自身抗原
Schellkens等按照前絲集蛋白cDNA序列，合成了31條可能含有抗原表位的9～19個氨基酸短肽，其中主要為306—324位，并將分子中不同部位的精氨‘酸替換成胍氨酸，以AFA陽性的RA患者血清采用競爭ELISA進(jìn)行篩選。在同一段肽鏈中，不同部位胍氨酸化，以及胍氨酸的數(shù)量均影響抗原與抗體的親和力，說明胍氨酸殘基是形成抗絲集蛋白抗體、抗核周因子抗體所識別抗原的抗原決定族中必要成分。CCP抗體的靶抗原為人工合成的前絲集蛋白306～324位氨基酸短肽，短肽中的1—2個精氨酸殘基被替換成胍氨酸。合成的短肽經(jīng)HPLC純化，純度達(dá)98％以上。
胍氨酸是人體中稀有氨基酸，通常是精氨酸在轉(zhuǎn)錄后經(jīng)肽精氨酸脫氨酶修飾而成，胍氨酸僅存在于包括絲集蛋白在內(nèi)的少數(shù)幾種蛋白中。在人黏膜細(xì)胞角質(zhì)顆粒中的絲集蛋白前體在細(xì)胞分化過程中被酶分解成10一12個絲集蛋白亞基。在此過程中，蛋白被去磷酸化，一些精氨酸殘基在酶催化下轉(zhuǎn)化成胍氨酸殘基。
（三）自身抗體
1．檢測方法 現(xiàn)僅有ELISA方法，并有商品試劑盒。
2．臨床意義 臨床資料顯示，CCP抗體對RA具有相當(dāng)高的特異性和敏感性（68％一75％），即使是RA早期患者，敏感度也有40％一60％。還有學(xué)者認(rèn)為，CCP抗體不僅是RA早期診斷指標(biāo)，而且是鑒別侵蝕性、非侵蝕性RA的靈敏指標(biāo)，CCP抗體陽性者通常出現(xiàn)或易發(fā)展成較抗體陰性者更嚴(yán)重的關(guān)節(jié)骨質(zhì)破壞。但zui近也有數(shù)個研究報道顯示CCP抗體對RA的敏感度在40％～50％，不及RF，聯(lián)合檢測CCP抗體和RF，將明顯提高診斷的敏感度。
現(xiàn)有的資料顯示，CCP抗體檢測的結(jié)果不能涵蓋AFA、AKA、APF和Sa抗體。有資料顯示，在RA中有56％的患者僅含有1種胍氨酸相關(guān)性抗體，僅7％患者AKA、AFA、抗Sa及抗CCP抗體全陽性。
