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上海研謹(jǐn)生物科技有限公司

抗體稀釋液和ELISA相關(guān)溶液的配制

時(shí)間:2010-7-21閱讀:3298
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抗體稀釋液和ELISA相關(guān)溶液的配制

窗體頂端

1、抗體或免疫球蛋白稀釋液0.01mol/L pH7.2PBS
  

 NaH2PO4·2H2O

0.39

Na2HPO4

1.27

NaCl

0.85

NaN3

200mg

H2O(蒸餾水)

至    1000ml

2、ELISA洗液及HRP標(biāo)記抗體稀釋液PH7.4PBST 

NaCl

2.0

KH2PO4

0.2

Na2HPO4·12H2O

2.9

KCl

0.2

NaN3

0.2

H2O

至    1000ml

吐溫(Tween20

0.5ml

  4°C保存?zhèn)溆?/font>

3、包被液(簡(jiǎn)稱(chēng)CBpH9.6  

Na2CO3

1.59

NaHCO3

2.93

NaN3

0.2

H2O

至    1000ml

  密封蓋好,4°C存放備用

4、ELISA底物液(可溶性底物)
  

磷酸-檸檬酸緩沖液pH5.0

 

0.1mol/L檸檬酸(21.014/100ml)

24.3ml

0.2mol/L Na2 HPO428.4/1000ml)

25.7ml

H2O

50ml

  4°C存放備用

5、DAB底物液(不溶性底物,組化病理等)
  

0.05mol/L pH7.6  Tris-HCL

 

Tris

6.05

HCL(36%)

3.15克(約2.7mlHCL

H2O

至                            1000ml

DAB3´,3´二氧基聯(lián)苯胺,不溶性底物,呈棕紅色

6DAB溶液配制:(組化及Western blot 顯色)
 稱(chēng)DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL緩沖液100ml溶解,如有沉淀,過(guò)濾后使用,一般新鮮配制使用。用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2濃度為0.01%,混均后使用。 73´,3´,5´,5´,-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)溶液配制:
 用二甲基甲酰胺(dimethylformamideDMF)或無(wú)水乙醇,將TMB配成1%濃度,4°C保存半年以?xún)?nèi)使用。使用前,用pH5.0磷酸-檸檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入30%H2O2 1ul,混勻后立即使用。2N H2SO4終止后,450nm測(cè)定OD值。 

8、1%離子瓊脂膠配制液
    作免疫雙相擴(kuò)散,單相擴(kuò)散及免疫電泳中使用。
   0.05UpH8.6巴比妥鈉-HCL緩沖液  

巴比妥鈉

23.8

1mol/L HCL

34.5ml

H2O

2150ml


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