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血磷濃度檢測試劑盒說明書

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磷濃度檢測試劑盒說明書

量法

意:正式測定之前選擇2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

規(guī)格:100T/96S

定意義:

磷主要指血中的無機(jī)磷, 以無機(jī)磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關(guān)系密切,在以 mg/dL 示時(shí),二的乘積(  [Ca×  [P)為 30~40 。當(dāng)(  [Ca×  [P)>40 ,則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨 織;若(  [Ca×  [P)<35 則妨礙骨的鈣化,甚至可使骨鹽溶解,影響成骨作用。血鈣和血磷含量 的相對(duì)穩(wěn)定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對(duì)平衡。上述平衡受到維生素 D、 旁腺素和降鈣素等激素的調(diào)節(jié)。

定原理:

除血清中有機(jī)磷后,無機(jī)磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸,被硫酸亞鐵還原后呈藍(lán)色,在620nm 光吸收;通過測定620nm吸光度,計(jì)算血液中磷含量。

自備儀器和用品

心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。 劑組成和配置:

劑一:液體×1 瓶,4℃保存。

劑二:液體×1 瓶,4℃保存。

試劑三:×1 瓶,4℃保存。  臨用前配制,依次加入11mL蒸餾水充分溶解,再加入試劑二,充

混合。

標(biāo)準(zhǔn)液:液體×1 支,1mmol/L無機(jī)磷,4℃保存。

血磷濃度測定操作

1. 光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長到620nm ,蒸餾水調(diào)零。

2取出標(biāo)準(zhǔn)液,室溫解凍。

3. 血清預(yù)處理: 吸取50μL血清,加950μL試劑一,混勻后室溫8000rpm ,離心10min ,取上清液,待 。

4. 空白管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入50μL蒸餾水,50μL試劑一,100μL試劑 ,混勻后靜置10min ,于620nm測定吸光度,記為A空白管。

5. 標(biāo)準(zhǔn)管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入50μL標(biāo)準(zhǔn)液,50μL試劑一,100μL試劑 ,混勻后靜置10min ,于620nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

6. 測定管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入50μL上清液,50μL試劑一,100μL試劑

,混勻后靜置10min ,于620nm測定吸光度,記為A測定管。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

磷濃度計(jì)算:

含量 ( mmol/dL=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)]× 樣品稀釋倍數(shù) ×V =2×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)

C 標(biāo)準(zhǔn)液:mmol/L;樣品稀釋倍數(shù):  (50μL血清+950μL試劑一) ÷50μL血清=20。

意事項(xiàng):

1 、 試劑三需臨用前配制,如未用完,4℃保存,最多可使用3天;

產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用!請(qǐng)勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途!


、 定過程中,應(yīng)盡量避免溶血,因?yàn)榧t細(xì)胞中有機(jī)磷酯進(jìn)入血清后可被酶水解而使得血 清無機(jī)磷含量增高。

、 最低檢出0. 1mmol/L。

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