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大鼠CD4分子(CD4)ELISA試劑盒使用說明書

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上海亨代勞科技有限公司主要從事實驗室設(shè)備,免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。并代理銷售多個國外,致力于為廣大高校、科研院

所和企事業(yè)單位提供*的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù)。咨詢.
       :021- 60536361,60526763
                      ,

 

4、溫育:37水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對照孔不加。
7、溫育:37水浴鍋或恒溫箱溫育30min
8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 50μL,再加入顯色劑B 50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37避光顯色15min。
10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、計算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
【大鼠CD4分子(CD4)Elisa試劑盒樣本要求】
1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3,因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能立即試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。
【大鼠CD4分子(CD4)Elisa試劑盒注意事項】
1、實驗嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
5、本試劑盒定量范圍為0.375-12 U/mL,超過此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果(0.375-12 U/mL范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間。
7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜
8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。
9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
 
【大鼠CD4分子(CD4)Elisa試劑盒操作程序總結(jié)】
 
準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
 

 
加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘
 
洗板4次,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
 
洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘
 
加入終止液
 
15分鐘之內(nèi)讀OD值
 
計算
 
【大鼠CD4分子(CD4)Elisa試劑盒檢測范圍
0.375 U/mL – 12 U/mL
【大鼠CD4分子(CD4)Elisa試劑盒規(guī)格】
96人份/盒
【大鼠CD4分子(CD4)Elisa試劑盒貯藏】
2-8,避光防潮保存。
【大鼠CD4分子(CD4)Elisa試劑盒有效期】
6個月

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