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上海一基實(shí)業(yè)有限公司

中級(jí)會(huì)員 | 第16年

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產(chǎn)品分類品牌分類

教學(xué)耗材試劑盒: 特色試劑盒

生物試劑: 化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)品對照品其他生化試劑抗體類測試盒類培養(yǎng)基類緩沖劑類表面活性劑分離材料及耗材維生素類色素類碳水化合物類植物激素及核酸類抗生素類蛋白質(zhì)類酶類氨基酸

低溫恒溫槽: DF-101S型集熱式磁力攪拌器高溫恒溫油浴高溫循環(huán)器低溫恒溫循環(huán)器高精度恒溫水槽.恒溫油槽高精度低溫恒溫槽低溫冷卻液循環(huán)泵（機(jī)）恒溫液循環(huán)泵（機(jī)）超級(jí)恒溫水槽.恒溫油槽低溫恒溫槽

制冰機(jī): 層析冷柜雪花制冰機(jī)

超聲波清洗機(jī): 超聲波細(xì)胞粉碎機(jī) 超聲波清洗機(jī)

對照品: 生化試劑

糖度計(jì)，折光儀: 糖度計(jì)，折光儀，折射儀

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器: 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52A

干燥箱: 真空干燥箱紅外線快速干燥箱

試劑盒: ELISA試劑盒

耗材設(shè)備: 硅膠板

熱銷產(chǎn)品

熱銷產(chǎn)品2

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小鼠睪酮（ELISA）使用說明書

時(shí)間：2010-12-13閱讀：243

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本公司專業(yè)供應(yīng)Elisa試劑盒，種屬齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量有保證。
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小鼠睪酮（T）定量檢測試劑盒（ELISA）

使用說明書

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒試劑盒名稱】

小鼠睪酮（T）定量檢測試劑盒（ELISA）

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒試劑盒用途】

定量檢測小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中睪酮（T）的含量。

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒檢測原理】

本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被小鼠睪酮（T）單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分，再加入酶標(biāo)工作液，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中小鼠睪酮（T）濃度呈正相關(guān)，450nm波長下測定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值，計(jì)算樣本中小鼠睪酮（T）含量。

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒試劑盒組成】

1	酶標(biāo)包被板	12孔×8條	7	顯色劑A液	6mL
2	標(biāo)準(zhǔn)品	0.3mL×6管	8	顯色劑B液	6mL
3	20倍濃縮洗滌液	25mL	9	終止液	6mL
4	樣本稀釋液	6mL	10	說明書	1份
5	特殊稀釋液	6mL	11	封板膜	2張
6	酶標(biāo)試劑	6mL	12	密封袋	1個(gè)

備注：標(biāo)準(zhǔn)品（1號(hào)→6號(hào)）濃度依次為：200、100、50、25、12.5、6.25 ng/L.

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒需要而未提供的試劑和器材】

1、37℃恒溫箱

2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

3、精密移液器及一次性吸頭

5、一次性試管

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒操作步驟】

1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對照孔不加。

4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板）。

6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對照孔不加。

7、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

8、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板）。

9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，平板混勻器混勻30s（或用手輕輕震蕩混勻30s），37℃避光顯色15min。

10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11、測定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。

12、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒樣本要求】

1、樣本不能含疊氮鈉（NaN₃），因?yàn)?/span>疊氮鈉（NaN₃）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒。

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒注意事項(xiàng)】

1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。

4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。

5、本試劑盒定量范圍為6.25-200ng/L，超過此范圍，為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得，不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果（6.25-200ng/L范圍內(nèi)），乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。

6、若顯色過淺，可適當(dāng)延長底物溫育時(shí)間。

7、為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個(gè)就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。

8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號(hào)的試劑不得混用。

9、底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒操作程序總結(jié)】

準(zhǔn)備試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品

加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)30分鐘

洗板4次，加入酶標(biāo)試劑，37℃反應(yīng)30分鐘

洗板4次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘

加入終止液

15分鐘之內(nèi)讀OD值

計(jì)算

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒檢測范圍】

6.25ng/L – 200ng/L

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒規(guī)格】

96人份/盒

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒貯藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【小鼠睪酮（T）Elisa試劑盒有效期】

6個(gè)月

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