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做實驗時細胞長的太慢怎么辦?

時間:2024/5/31閱讀:393
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做實驗時,細胞長的太慢是什么情況?

很多小伙伴可能都會遇到,當自己做實驗時,自己培養(yǎng)的細胞昏昏欲睡,就是不長,讓人很是著急啊。
這個時候我們該怎么辦呢?為了讓我們的細胞茁壯成長,我們自然要找到問題,想個辦法!下面就讓小編來給大家分析下吧!

細胞生長緩慢的常見原因:

1.培養(yǎng)基可能缺乏細胞生長所需的某種因子
通常情況下,當小伙伴購買細胞,并沒有按照ATCC或國內(nèi)細胞庫推薦的方法制備培養(yǎng)基,使用實驗室兄弟姐妹使用的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。解決方法一般是按照推薦的方法制備培養(yǎng)基,或直接購買培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基。

2.許多細胞的生長依賴于密度
如果傳代后細胞密度過小,也會影響細胞生長。這段時間沒有什么特別好的,就是更換液體。如果細胞培養(yǎng)瓶為T75,則可以消化、離心、復蘇,然后接種到T25瓶中。

3.細菌、支原體、真菌等污染
雖然培養(yǎng)基中通常添加雙抗體(青霉素和鏈霉素),但如果無菌操作觀念不強,仍有可能造成污染。處理方法:如果有冷凍細胞,可以丟棄污染細胞。當然,丟棄并不是隨意的,扔進垃圾桶。應(yīng)按照實驗室生物安全規(guī)定進行。然后復蘇培養(yǎng)物,建議培養(yǎng)箱*消毒。

如果不冷凍,而且這種細胞非常珍貴,常用的治療方法是藥物治療:細菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染加抗真菌藥物;支原體污染再加上抗支原體藥物,具體藥物可以咨詢技術(shù)支持,他們會更加專業(yè)。
 
4.換液間隔時間太長
一些小伙伴真的把細胞“佛"系生長。當他們想到它的時候,才會換下液體,相信一個句子:“你已經(jīng)是一個成熟的細胞了,你應(yīng)該學會養(yǎng)活自己,成長"。在這種情況下,細胞培養(yǎng)瓶中積累了大量的細胞代謝廢物,影響細胞活性。推薦:勤奮點。

5.冷凍細胞中添加DMSO(二甲基亞砜)的量不正確
沒有逐漸梯度冷卻,下一次恢復后的細胞總是壞的。
處理方法:按推薦的冷凍保存方法制備冷凍液。部分細胞適合10% DMSO,部分細胞適合5% DMSO;嚴格遵循漸變冷卻的原則,細胞恢復后迅速解凍。

6.細胞的“消化"時間不宜過長
減少對細胞的損傷,此外,EDTA一般添加到胰腺酶中,螯合鈣離子,影響細胞粘附。
治療方法:控制細胞“消化"時間,盡量去除干凈的胰蛋白酶和EDTA。

7.PH值
細胞需要在一定的PH值下生長,這個小朋友都知道。但是很多時候PH值是我們忽略的東西。隨著使用時間的增加,我們使用的介質(zhì)可能會慢慢變成堿性!(當然,它也可能變酸,但改變堿是常見的)。一般來說,過堿的培養(yǎng)基會影響細胞的生長。治療:簡單的方法就是更換新鮮的培養(yǎng)基!當然,如果你有時間和條件,你可以調(diào)整介質(zhì)的pH值。


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