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技術(shù)文章

上海源葉-單核細(xì)胞增生李斯特菌

閱讀:519          發(fā)布時(shí)間:2013-11-29

北美和歐洲食源性單核細(xì)胞增生李斯特菌病暴發(fā)頻繁,且死 亡率髙達(dá)30%,促使人們對(duì)食品中的單核細(xì)胞增生李斯特菌日益關(guān)注。在每克軟奶酪和肉餡餅樣品中,單核細(xì)胞增生李斯特菌的數(shù)目能達(dá)到10%其他菌體數(shù)量較多的食品是 冷凍的即食沙拉。一些微生物檢測(cè)規(guī)程規(guī)定在2¾食品中不得檢出單核細(xì)胞增生李斯特 菌,但實(shí)際上,大部分食品都會(huì)有少量的單核細(xì)胞增生李斯特菌存在。

根據(jù)菌體生存環(huán)境的不同,應(yīng)釆用不間的增菌方法。如有些食品中的單核細(xì)胞增生 李斯特菌需要采用液體增菌,另外一些食品可能需要預(yù)增菌,還有一些則可以直接進(jìn)行平 板計(jì)數(shù)。美國食品藥物管理局(FDA)研制了一種單核細(xì)胞增生李斯特菌的檢測(cè)方法,該 方法被牛奶聯(lián)合會(huì)釆用,并形成ISO 10560:1993標(biāo)準(zhǔn),既牛奶和乳制品中單核細(xì)胞 增生李斯特菌的檢測(cè)方法。該方法先用吖啶黃素萘啶酮酸肉湯對(duì)樣品增菌,再轉(zhuǎn)接到瓊 脂平板上分離菌株。

標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)制定了單核細(xì)胞增生李斯特菌檢測(cè)(ISO 11290-1:1997)和 計(jì)數(shù)(ISO 11290-2:1997)的通用方法。該方法檢測(cè)時(shí)采用兩步增菌法,即先將食品樣品 加入50%Fnjser肉湯中增菌,然后用同樣的肉湯進(jìn)行二次增菌,增菌液轉(zhuǎn)接到牛津瓊脂 (見305頁>和多黏菌素-吖啶黃-氯化鋰一頭孢他啶-七葉苷-甘露薛瓊脂(PAL- CAM,見309頁)上進(jìn)行菌落分離??酪允褂镁彌_蛋白胨水(DALCAM)或Fraser肉湯(見 395頁)基礎(chǔ)液(即不含選擇劑的Kraser肉湯)作為樣品稀釋液。用常規(guī)方法制備⑴倍樣 品稀釋系列,用PALCAM瓊脂倒平板。用Fmser肉湯基礎(chǔ)液作為起始稀釋液的優(yōu)點(diǎn)是,做完平板計(jì)數(shù)時(shí),在肉湯中加人適量的補(bǔ)充液就可以進(jìn)行樣品的初步增菌,這樣,可以同 時(shí)進(jìn)行高菌體含量的計(jì)數(shù)(>10/g)和低菌體含量的檢測(cè)(1/I0g或l/25g)。

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