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技術(shù)文章

熒光顯微鏡標(biāo)本制作的要求

閱讀:819          發(fā)布時(shí)間:2011-5-27

(一)載玻片
載玻片厚度應(yīng)在0.8~L 2mm之間,太厚的玻片,一方面光吸收多,另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚焦。載玻片必須光潔,厚度均勻,無明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英載玻片。

(二)蓋玻片
蓋玻片厚度在o.17mm左右,光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光,也可用干涉蓋玻片,這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長的光起不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過,而反射激發(fā)光,這種反射的激發(fā)光又可激發(fā)標(biāo)本。

(三)標(biāo)本
組織切片或其他標(biāo)本不能太厚,如太厚激發(fā)光大部消耗在標(biāo)本下部,而物鏡直接觀察到的上部不能充分激發(fā)。另外,細(xì)胞重疊或雜質(zhì)掩蓋、背景非特異染色引起的熒光影響判斷。

(四)鏡油
一般暗視野熒光顯微鏡和油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須使用鏡油,使用特制的無熒光鏡油,也可用甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。
 

 

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