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技術(shù)文章

大腸桿菌顯色培養(yǎng)基

閱讀:765          發(fā)布時間:2011-5-25

大腸桿菌顯色培養(yǎng)基
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測。大腸桿菌顯藍(lán)綠色,大腸菌群顯無色,其它菌顯黃色或無色,革蘭氏陽性菌被抑制。


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成份 (g/L)

特殊營養(yǎng)物質(zhì)
37.9

顯色劑
0.2

瓊脂
12.0

pH 6.8 ± 0.2 25 ℃
 

此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得*的結(jié)果。

注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。
用法
稱取本品 50.1g 加入 1000ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過 1 分鐘。分裝三角瓶, 121 ℃ 高壓滅菌 15 分鐘。取 1ml 制備好的樣品液加入直徑為 9cm 無菌平皿中心,傾入冷卻至 45 -50 ℃ 培養(yǎng)基約15ml ,混勻,凝固后, 36 ± 1 ℃ 倒置培養(yǎng) 18 ~ 24h ?;蚶鋮s至 45-50 ℃時,傾入無菌平皿,瓊脂*凝固后,在 37 ℃的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時,加入適當(dāng)稀釋度的樣品液 1ml ,涂布于培養(yǎng)基上, 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 18 ~ 24h 。
貯存
制備好的平板應(yīng)立即使用,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
1 、按國家標(biāo)準(zhǔn)、 SN 標(biāo)準(zhǔn)、 FDA 標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液
2 、取樣品液 1ml 加入 冷卻至 45-50 ℃顯色培養(yǎng)基中混勻或 涂布于平板上
3 、 36 ± 1 ℃ 培養(yǎng) 18 ~ 24h ,選用有 30 ~ 200 個菌落的平板,計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。
總大腸桿菌 = 藍(lán)綠色菌落
4 、對可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上, 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 12-16 小時,挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(yàn) ( 本公司有生化鑒定管套裝 20 支 x3 種 )
質(zhì)量控制
1 、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈乳白色。制備好的平板呈透明無色固體培養(yǎng)基。
2 、微生物試驗(yàn)
在 36 ± 1 ℃ 培養(yǎng) 18 ~ 24h 小時: 質(zhì)控菌株
ATCC
生長情況
菌落顏色

單增李氏菌
27853
-/+
無色

金黃色葡萄球菌
25923
-/+
無色

大腸桿菌
25922
+++
藍(lán)色

沙門氏菌
+++
無色

大腸菌群
+++
無色
 


方法的局限性
該顯色培養(yǎng)基鑒定大腸桿菌 ,少數(shù)情況下可能會出現(xiàn)假陽性,但不會出現(xiàn)假陰性,有時可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。
典型特征
大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,大腸菌群為無色菌落,其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。

參考文獻(xiàn)
FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of ?-glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. – J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
KILIAN, M. a. BüLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. – Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la ?–galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bactériologique, en particulier des Enterobacteriaceae. – Ann. Inst. Pasteur ( Paris ), 102; 267-277 (1962). 
 

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