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技術(shù)文章

化學(xué)發(fā)光免疫測定(CLIA)技術(shù)

閱讀:495          發(fā)布時(shí)間:2010-12-7

  化學(xué)發(fā)光免疫測定(Chemiluminesent Immunoassay,CLIA)是免疫測定技術(shù)繼酶免技術(shù)(EIA)、放免技術(shù)(RIA)、熒光免疫技術(shù)(FIA)和時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)(TRFIA)之后發(fā)展的一項(xiàng)新興測定技術(shù)。要談化學(xué)發(fā)光免疫測定技術(shù)就必須先談化學(xué)發(fā)光。

  化學(xué)發(fā)光技術(shù)是近二、三十年來發(fā)展起來的一種測定方式,其利用化學(xué)反應(yīng)釋放的自由能激發(fā)中間體(常用堿性磷酸酶-金剛烷胺),使其從激發(fā)態(tài)回到基態(tài),當(dāng)中間體從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時(shí)會(huì)釋放等能級(jí)的光子,對光子進(jìn)行測定而進(jìn)行定量分析?;瘜W(xué)發(fā)光具有熒光的特異性,同時(shí)不需要激發(fā)光,就避免了熒光分析中激發(fā)光雜散光的影響有很高的靈敏度,并且不象放射分析那樣存在強(qiáng)烈的環(huán)境污染和健康危害,是一種非常的定量分析方法。

  雖然化學(xué)發(fā)光具備很高的特異性和很小的干擾,但化學(xué)分析本身的不特異性,制約了整個(gè)方法的使用。因此,如同RIA、FIA等一樣利用免疫反應(yīng)的特異性和化學(xué)發(fā)光本身的信號(hào)特異性形成了目前所說的化學(xué)發(fā)光免疫測定(CLIA)技術(shù)。

  CLIA是一種高度敏感的微量測定技術(shù),凡具有抗原性的物質(zhì)(包括半抗原)都可以用CLIA測定。其起步于80年代初,快速發(fā)展于90年代,在國外CLIA的應(yīng)用處于蓬勃發(fā)展的階段,其具備以下特點(diǎn)

  ①高度敏感,極限達(dá)10-17-10-19M/L,遠(yuǎn)高于RIA、EIA,與TRFIA相當(dāng)?shù)萒RFIA便宜。

  ②特異性強(qiáng),重復(fù)性好C.V.<5%。

  ③測定范圍寬,可達(dá)7個(gè)數(shù)量級(jí)。

  ④試劑穩(wěn)定性好,無污染有效期6-12月。

  ⑤操作簡單,易于自動(dòng)化。

  在對環(huán)保很重視的國家,CLIA成了取代RIA的方法。
 

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