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ELSD蒸發(fā)光散射檢測器的操作步驟

時(shí)間:2018-7-9 閱讀:5557
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ELSD蒸發(fā)光散射檢測器的應(yīng)用范圍包括:碳水化合物,藥物,脂類,甘油三脂,未衍生的脂肪酸和氨基酸,聚合物,表面活化劑,營養(yǎng)滋補(bǔ)品,及組合分子庫等。蒸發(fā)光散射檢測器消除了常見于其他HPLC檢測器的問題。示差檢測受溶劑前沿峰的干擾使得分析復(fù)雜化,并且由于溫度極其敏感使得基線很不穩(wěn)定,與梯度洗脫不相容。另外,示差檢測器的響應(yīng)不如ELSD靈敏。而低波長紫外檢測器在急變梯度條件下受基線漂移的困擾,并要求被分析化合物帶有發(fā)色團(tuán)。ELSD則不受這些限制。不同于這些檢測器,ELSD能在多溶劑梯度的情況下獲得穩(wěn)定的基線,使得分辨率更好、分離速度更快。另外,因?yàn)镋LSD的響應(yīng)不依賴于樣品的學(xué)特性,所以ELSD檢測時(shí)樣品不要求帶有發(fā)色團(tuán)或熒光基團(tuán)。
 

ELSD蒸發(fā)光散射檢測器操作步驟:
 
步驟1:霧化
 
經(jīng)HPLC分離的柱洗脫液進(jìn)入霧化器,在此與穩(wěn)定的霧化氣體(一般為氮?dú)猓┗旌闲纬蓺馊苣z。氣溶膠由均勻分布的液滴組成,液滴大小取決于分析中采用的氣體流量。氣體流量越低形成的液滴越大,液滴越大則散射的光越多,從而提高了分析靈敏度,但是越大的液滴在漂移管中越難蒸發(fā)。每種方法均存在產(chǎn)生佳信號噪音比率的優(yōu)化氣體流量。流動(dòng)相流速越低要求適當(dāng)霧化的氣體流量也越低。用內(nèi)徑為2.1mm的微徑柱代替內(nèi)徑為4.6mm標(biāo)準(zhǔn)型分析柱,能大大降低流動(dòng)相流速,因而提高分析的靈敏度。
 
步驟2:蒸發(fā)
 
氣溶膠中揮發(fā)性成分在加熱的不銹鋼漂移管中蒸發(fā)。為特定應(yīng)用設(shè)置適當(dāng)?shù)钠乒軠囟龋Q于流動(dòng)相組成和流速,以及樣品的揮發(fā)性。高有機(jī)含量流動(dòng)相比高含水量流動(dòng)相要求蒸發(fā)的漂移管溫度低。流動(dòng)相流速越低比流動(dòng)相流速越高要求蒸發(fā)的漂移管溫度越低。半揮發(fā)性樣品要求采用較低的漂移管溫度,以獲得佳靈敏度。佳溫度需要通過觀察各溫度時(shí)的信號噪音比率來確定。
 
步驟3:檢測
 
懸浮于流動(dòng)相蒸汽中的樣品顆粒從漂移管進(jìn)入到光散射檢測池。在檢測池中,樣品顆粒散射激光光源發(fā)出的光而蒸發(fā)的流動(dòng)相不散射。散射光被硅光電二極管檢測,產(chǎn)生電信號輸送模擬信號輸出端口,被用于模擬輸出的數(shù)據(jù)采集。
 

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