使用C18柱的循環(huán)制備純化案例 三萜皂苷
色譜條件:
色譜柱為C18柱（直徑20×長(zhǎng)500mm）；流動(dòng)相乙腈:甲醇（3∶2）；體積流量5mL/min；柱溫：室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm和RI檢測(cè)器；進(jìn)樣量6mL。
上：紫外譜圖；下：RI譜圖
色譜分離:
將待分樣品溶于流動(dòng)相乙腈:甲醇（3∶2），采用 ODS C18色譜柱分離，分別用UV 檢測(cè)器及RI檢測(cè)器檢測(cè)峰信號(hào)（見上）。樣品通過色譜柱時(shí)檢測(cè)到4 個(gè)峰信號(hào)，保留時(shí)間為50～85min。在保留時(shí)間為50 min 時(shí)啟動(dòng)儀器的循環(huán)系統(tǒng)，不收集組分，這樣可以把前面的雜質(zhì)峰除去，只保留樣品峰，從而單獨(dú)使樣品在整個(gè)系統(tǒng)中循環(huán)一次，相當(dāng)于樣品兩次通過C18色譜柱，進(jìn)行兩次分離。在保留時(shí)間為100 min 時(shí)根據(jù)峰信號(hào)開始收集各組分。
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