1.收到 細胞，di一時間要鏡檢：調查細胞形態(tài)是否正常，關于貼壁細胞則要留意看貼壁狀況是否很好，調查細胞密度，有疑議及時咨供給細胞的技術人員。由于運送的時間或許溫度的改變，許多貼壁細胞在盛滿培育基的瓶子里成長的狀況平和時會有點不一樣，主要是貼壁結實問題。比如293T，平常貼壁就不是很牢，在裝滿的培育基瓶子里邊，會發(fā)生大片的脫落，細胞集合在一起，但是細胞成長還是正常的，經(jīng)過離心搜集，加以胰酶的消化，從頭打散，又能夠正常的貼壁成長。
2.當經(jīng)過上一步的調查，細胞初步?jīng)]有任何問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培育基，僅保留5到10mL培育所需的慣例培育基；或更換新鮮的培育基，置于培育箱中，隨后每天調查。細胞在低于正常成長溫度狀況下，會調整為停止期，或許慢速成長期，有必要康復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能從頭調整到接近對數(shù)成長期的狀況，在對數(shù)成長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。
3.如果經(jīng)di一步調查發(fā)現(xiàn)細胞密度超越90%，而且 細胞 狀況很好時，則復溫后2個小時需求立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。關于成長比較快，狀況安穩(wěn)，不易受外界影響的細胞能夠一次多傳幾瓶；關于成長較慢，細胞比較薄，狀況容易動搖的細胞類型，一次少傳些，保證每瓶細胞密度大些，便于安穩(wěn)成長。至于一些比較生疏的細胞，di一次處理也能夠按照第二種狀況。
