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研域小貼士:一抗的挑選要點和技巧是什么?

時間:2020/5/12閱讀:1760
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(1)單克隆和多克隆抗體的挑選:

?
由一種克隆發(fā)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能方針明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就像dao彈地 射中方針一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來發(fā)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應 中,一般單克隆抗體特異性強,但親和力相對小,檢測抗原靈敏度相對就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強,靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可 以經(jīng)過關閉等防止)。


(2)使用規(guī)模的挑選:


有的一抗只能用于Western blotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;乃至標明白臘切片或冰凍切片。


(3)種屬反應性的挑選:


這一點很重要,標明這種抗體可能存在種屬差異,且這種抗體適合檢測哪種種屬動物體內(nèi)的抗原。


(4)種屬來歷:


一般兔來歷的多是多克隆;而小鼠來歷的多是單克隆,但也有別的。根據(jù)此來歷來挑選相應的二抗。


(5)生產(chǎn)廠家的挑選:


不同廠家的同一種抗體它的實際效價,穩(wěn)定是不同的。
  

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