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高速逆流色譜儀的應(yīng)用概念
閱讀：1033發(fā)布時(shí)間：2024-2-22
高速逆流色譜儀是一種液相色譜技術(shù)，利用液液兩相的逆流分配，在不需要使用固態(tài)固定相的情況下，通過(guò)離心力將固定相保留在一系列連接的腔體中，實(shí)現(xiàn)復(fù)雜化學(xué)物質(zhì)的混合物分離。它以液體溶劑為固定相，利用離心力產(chǎn)生的恒定力將兩相互相混合，保留其中一相，并通過(guò)恒流泵連續(xù)輸入另一相，樣品溶質(zhì)在兩相之間反復(fù)分配，按分配系數(shù)的次序逐漸洗脫出來(lái)。
高速逆流色譜法是建立在單向性流體動(dòng)力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法，它是在研究旋轉(zhuǎn)管的流體動(dòng)力平衡時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)螺旋管在慢速轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，螺旋管中的兩相都從一端分布到另一端。用某一相作移動(dòng)相從一端向另一端洗脫時(shí)，另一相在螺旋管里的保留值大約50%，但這一保留量會(huì)隨著移動(dòng)相流速的增大而減小，使分離效率降低。但使螺旋管的轉(zhuǎn)速加快時(shí)，兩相的分布發(fā)生變化。當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到臨界范圍時(shí)，兩相就會(huì)沿螺旋管長(zhǎng)度分開(kāi)，其中一相全部占據(jù)首端的一段，我們稱這一相為首端相，另一段全部占據(jù)尾端的一段，稱為尾端相。高速逆流色譜正是利用了兩相的這種單向性分布特征，在高的螺旋管轉(zhuǎn)動(dòng)速下，如果從尾端送入首端相，它將穿過(guò)尾端相而移向首端，同樣，如果從首端相送入尾相，它將穿過(guò)首端相而移向螺旋管的尾端。分離時(shí)，在螺旋管內(nèi)首先注入其中的一相(固定相)，然后從合適的一端泵入移動(dòng)相，讓它載著樣品在螺旋管中無(wú)限次的分配。儀器轉(zhuǎn)速越快，固定相保留越多，分離效果越好，且大地提高了分離速度，故稱高速逆流色譜。
廣泛的應(yīng)用范圍和適應(yīng)性：適用于分離各種極性范圍的樣品，尤其在分離天然化合物方面表現(xiàn)比較好。由于不需要固體載體，消除了氣液色譜中的吸附現(xiàn)象，適用于分離極性物質(zhì)和具有生物活性的物質(zhì)。
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