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高速逆流色譜儀的儀器構造介紹
閱讀：1825發(fā)布時間：2022-7-19
高速逆流色譜(high speed countercurrentchromatography，簡稱HSCCC)是一種液-液色譜分離技術，它的固定相和流動相都是液體，沒有不可逆吸附，具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點。由于HSCCC與傳統(tǒng)的分離純化方法相比具有明顯的優(yōu)點，因此此項技術己被廣泛應用于中藥成分分離、保健食品、生物化學、生物工程、天然產(chǎn)物化學、有機合成、環(huán)境分析等領域。
儀器構造
儀器的中心部分：(a) ITO多層線圈分離柱，它是由100-200毫米長、內徑為1.6mm左右的聚四氟乙烯管沿具有適當內徑的內軸共繞十多層而成，其管內總體積可達300mL左右。(b)平衡器，它可以調節(jié)重量，它的作用是讓(a)， (b)相對于中心軸兩邊重量平衡。當在旋轉控制器的控制下，在齒輪傳動裝置作用下，(a)，(b)同時繞中心軸作順時針或反時針的行星運動，即(a)- (b)本身既在自轉，但同時又在繞中心軸公轉，公轉轉速可從0-4000r/min。從線圈分離柱中通過中空的中心軸還同時牽引出了線圈的兩端，一端供泵入液用，一端輸出液體。儀器工作需要互不相溶的兩種液體，一相作固定相， 一相作移動相。儀器工作前，先將作為固定相一相的液體通過恒流泵壓入線圈分離柱，然后用進樣器將待分離的樣品進樣，*后用恒流泵壓入移動相，同時啟動中心部分運轉直到轉速大于600r/min。此時，兩相在線圈分離柱中具有相對運動之勢。由于移動相源源不斷的壓入，阻止了固定相的流出，同時，移動相帶著樣品在線圈分離柱中進行無限次的分配而使復雜樣品得到分離。當移動相經(jīng)過檢測器時，由于不同的樣品組分會產(chǎn)生不同大小的信號，用記錄儀就能得到逆流色譜圖譜，同時用餾分收集器分步收集移動相就會得到復雜樣品被分開的組分。較大的制備型HSCCC，柱容積可達530m1，一次*多進樣可達20g粗品；較小的分析型的HSCCC柱容積為8m1，進樣量為幾十微克，*大轉速可達4000r/min。
高速逆流色譜的原理
1.逆流色譜是20世紀50年代源于多極萃取技術（非連續(xù)性）但是多極萃取設備*大復雜、易碎、溶劑體系容易乳化，溶劑耗量大，分離時間長。
2. 通過公轉、自轉（同步行星式運動）產(chǎn)生的二維力場，保留兩相中的其中一相作為固定相。
2.通過高速旋轉提高兩相溶劑的萃取頻率，1000rpm旋轉時可達到17次/s頻率的萃取過程。
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