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分子雜交儀原理和操作

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分子雜交儀廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中定基因序列的定性、定量檢測和疾病的診斷等方面。因而它不僅在分子生物學(xué)域中具有廣泛地應(yīng)用,而且在臨床診斷上的應(yīng)用也日趨增多。

原理

分子雜交儀其基本原理就是應(yīng)用核酸分子的變性和復(fù)性的性質(zhì),使來源不同的DNA(或RNA)片段,按堿基互補關(guān)系形成雜交雙鏈分子。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成。

核酸分子雜交是基因診斷的基本的方法之。它的基本原理是:互補的DNA單鏈能夠在定條件下結(jié)合成雙鏈,即能夠行雜交。這種結(jié)合是異的,即嚴(yán)格按照堿基互補的原則行,它不僅能在DNA和DNA之間行,也能在DNA和RNA之間行。因此,當(dāng)用段已知基因的核酸序列作出探針,與變性后的單鏈基因組DNA接觸時,如果兩者的堿基配對,它們即互補地結(jié)合成雙鏈,從而表明被測基因組DNA中含有已知的基因序列。由此可見,行基因檢測有兩個條件,是需的異的DNA探針;二是需的基因組DNA。當(dāng)兩者都變性呈單鏈狀態(tài)時,就能行分子雜交。

操作步驟

1.接通電源打開開關(guān),行參數(shù)設(shè)定。參數(shù)設(shè)定,接通電源→按"選擇"鍵到相應(yīng)的參數(shù)行→按"設(shè)定"鍵,該行位開始閃爍,入修改狀態(tài)→按"置數(shù)"鍵,數(shù)字0~9循環(huán)到達所需的數(shù)字后按"移位"鍵到下位數(shù)字修改后,按"設(shè)定"鍵確認(rèn)。按"選擇"鍵可選擇修改其他數(shù)據(jù)或回到正常顯示狀態(tài)。

2.達到所設(shè)定的溫度后按"運行"鍵試運行30min。

3.按"停止"鍵然后將所要雜交的東西放到儀器內(nèi)按"運行"鍵開始運行。

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