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二手液相色譜儀 樣品預處理注意事項

閱讀:3242        發(fā)布時間:2019/9/3
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在使用二手液相色譜儀時常由于在樣品的預處理,標準溶液的制備,樣品液的測定,分析中的污染,儀器常見故障等等問題上的不注意,而引起大的系統(tǒng)誤差,使整個測定分析失敗?,F(xiàn)就液相色譜分析的應用中 樣品預處理注意事項 作簡要分析,以達到更好的檢測效果。

 

樣品預處理注意事項-樣品預處理方法

 

樣品預處理應包括:稱重、溶解、稀釋、過濾、萃取、柱前衍生、低壓柱層析。這些操作可以是手工進行或實行自動化操作。

 

1、樣品預處理的目的是除去干擾物、增加檢測器靈敏度(富集) 、保護色譜柱等。樣品預處理同時也是為了避免色譜分離故障,其中樣品萃取是關鍵的一步,要從大量的干擾物中萃取出微量組分難度極大。

有些樣品經(jīng)預處理后還不能作進樣分析,需進行衍生化處理,使一些無紫外吸收或無熒光的組分,經(jīng)過衍生化后能用紫外和熒光檢測器檢測,這樣既提高了靈敏度,又改善了分離度(質量變化) 。

樣品預處理的同時也會帶來一些問題,如樣品損失、樣品被污染、衍生化反映不*或多種反應物生成等。衍生反應常會影響試驗的度,或者在整個樣品預處理過程中帶來誤差。

 

2、用于液相色譜分析的樣品溶液須均勻而無顆粒,有顆粒會損壞進樣器并阻塞柱頭。處理好的樣品在準備上柱前應對準光線搖動,檢查樣品溶液中有無顆粒。

只要看到顆粒、混濁或乳化,就應過濾一下,過濾膜要能截留住015μm 以上的顆粒,樣品過濾的過程中可能引起:樣品被污染,因過濾吸附降低樣品組分的含量,樣品溶劑揮發(fā)引起誤差。萃取的目的是從共溶的樣品介質中分離出被分析的組分,或者減少損壞柱的物質(如蛋白質等)和干擾物。

 

3、一般采用有機溶劑萃取,要求萃取用的溶劑毒性低、揮發(fā)性好、雜質少、對待測樣品有良好的溶解度且又與水不相混溶。常用的有醋酸乙酯、二氯甲烷、苯或者兩種以上的混合溶劑。萃取后一般可直接進樣,有時需要濃縮或吹干濃縮,再用定體積的液體或流動相溶解進樣。

這樣增加了樣品濃度,提高了靈敏度,同時避免了溶劑峰對樣品峰的干擾。在萃取是要考慮樣品分子的溶解能力。除了脂溶性和水溶性組分外,還有用脂溶性的組分制成水溶性的鹽。

 

樣品預處理注意事項-分析中的污染

 

一般檢測的環(huán)境、容器、試劑都是影響測定結果的因素。

 

環(huán)境污染

儀器室的有害氣體、氣溶液、灰塵等等都能造成污染,影響檢測結果,這種污染很難校正。因此,儀器室與其他實驗室應隔離,保持清潔,儀器室內(nèi)應安裝空調,注意防潮、防腐、防震、空氣相對濕度應小于70 %為宜。

 

容器

實驗室常用的器皿有玻璃類、瓷類、石英類、塑料類等,在進行分析時,應按照待則樣品的要求來選則器皿,不管使用哪種器皿,容器的洗條清潔都是很重要的,也是取得好的檢測結果的基本保證。

 

試劑

在液相色譜分析中,所選用的試劑須是色譜純、優(yōu)級純或分析純,如果用含量有雜質的試劑,則會出現(xiàn)雜峰而影響測定結果。

 

樣品預處理注意事項-標準溶液的配置

 

在配置標準溶液時,先要配置現(xiàn)定濃度的內(nèi)標溶液,在標準溶液和樣品溶液中定要使用同一批次配制的內(nèi)標溶液以減少誤差。

(1) 配制標準溶液的物質應當是色譜純的、性質穩(wěn)定。

(2) 常用的標準溶液應存放在棕色溶液瓶中低溫保存。

(3) 在配制維生素類標準品時,要放置在棕色容量瓶中或避光放置以免分解。

 

樣品預處理注意事項-故障與解決辦法

 

(1) 色譜圖中出現(xiàn)無關的峰,原因有可能是樣品過濾器帶來污染,解決方法如下:

①將過濾器浸泡在樣品溶劑中并進樣試驗; ②改變過濾器類型; ③采用交替清洗技術。

(2) 一些或全部化合物的峰比預期的小,尤其是低濃度的樣品,原因可能是樣品過濾器表面吸附下降,解決方法如下:①改變過濾器類型; ②嚴格按相同條件處理所用樣品; ③采用交替清洗技術。

(3) 回收率太低或差,原因可能是萃取不*,解決方法如下:①增加萃取時間,使用熱溶劑; ②修改清洗方法。

(4) 色譜峰變寬,柱壽命縮短,原因可能是樣品帶來的干擾與污染,應改進清洗方法。

(5) 精度差,原因可能是回收不*,解決方法如下:①改進或替換衍生化、分離、萃取或其他條件; ②用自動化處理裝置提高精度。

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