人臍靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞
| 參考價(jià) | ￥1-￥560/件 |
- 公司名稱 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌上研生
- 型號(hào)
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間2025/5/15 9:16:21
- 訪問(wèn)次數(shù) 67
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | YS-01X7292 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人臍靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人臍靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人臍靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 臍帶組織 |
英文名稱 | Human Umbilical Vein Endothelial Cells | 貨號(hào) | YS-01X7292 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自臍帶組織；它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)，臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
公司產(chǎn)品：
胰腺癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml | Hyp ELISA Kit 大鼠羥Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
alpha COP I： COPA蛋白抗體 0.2ml | GNAI3： 抑制型G蛋白α3抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CENPO 著絲粒蛋白O抗體 規(guī)格 0.2ml | PCDHA5： 原鈣粘附蛋白α5抗體 0.2ml |
Anti-Nitric oxide/NO/FITC 熒光素標(biāo)記抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GATA-3(GATA binding factor 3) GATA結(jié)合蛋白3抗原 0.5mg |
Goat Anti-human serum albumin/Gold 金標(biāo)記羊抗人白蛋白(10/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | Music Acetylcholine receptor M3： 毒蕈堿型乙酰受體M3抗體 0.1ml |
CD2 Others Canine 狗 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人毛細(xì)胞HHDPC | HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人前列腺平滑肌細(xì)胞(HPSMC)(5×105) 細(xì)胞名稱 種屬 | 人細(xì)胞(HN) (10×106 ) |
HUVEC-c Growth Medium 2 pooled 500,000cells 肺大靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 牛胚氣管細(xì)胞;EB (NBL-4) 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株，ECV304細(xì)胞 TC-1細(xì)胞，HPVl6 E6、E7和ras基因共轉(zhuǎn)化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮細(xì)胞 |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5 | 人臍靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞PCDHA5： 原鈣粘附蛋白α5抗體 0.2ml |
H293T細(xì)胞，人類胚胎腎臟表皮細(xì)胞 貓腎細(xì)胞,CRFK細(xì)胞 CL-0267CNE-2Z(人鼻咽癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HA-sp L |
腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | TLK2 Others Human 人 TLK2 / PKU-ALPHA (aa 397-772) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
HBEpC-c 人支氣管上皮細(xì)胞(HBEpC) 500,000cells 主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Anti-gp130/IL-6R /FITC 熒光素標(biāo)記白介素-6受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-RNF126 環(huán)指蛋白126抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5 蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL |
Rhesus antibody Rh phospho-NFATc2(Ser330) 0酸化核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL11 Kelch樣蛋白11抗體 規(guī)格 0.2ml |
HBsAb 乙型肝炎表面抗體 96T | CD2 Others Canine 狗 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
操作步驟：
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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