美德聲推出細(xì)胞過(guò)敏原刺激試驗(yàn)ELISA試劑

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

過(guò)敏原與嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞等特殊細(xì)胞上的 IgE 分子接觸時(shí)會(huì)產(chǎn)生和/或分泌過(guò)敏介質(zhì)，例如白三烯或組胺。與組胺相反，在假性過(guò)敏的情況下，白三烯也被合成和釋放，反應(yīng)類似于過(guò)敏，但不涉及任何 IgE 分子。

CAST® ELISA 即細(xì)胞過(guò)敏原刺激試驗(yàn)試劑，也可以被視為體外過(guò)敏激發(fā)試驗(yàn)。收集的患者白細(xì)胞血液分?jǐn)?shù)將在體外暴露于可疑的特定過(guò)敏原。孵育后，細(xì)胞上清液將通過(guò)高度特異性的 ELISA 檢測(cè)磺胺三烯的從頭合成。

該測(cè)試不僅可以檢測(cè) IgE 介導(dǎo)的過(guò)敏，還可以檢測(cè)假性過(guò)敏。后一種過(guò)敏以阿司匹林 （ASA） 和其他非甾體抗炎藥 （NSAID） 以及各種其他藥物或食品添加劑而聞名。

CAST® ELISA 的主要應(yīng)用

CAST® 檢測(cè)可用于確認(rèn)任何 IgE 介導(dǎo)的過(guò)敏，但經(jīng)典檢測(cè)（病史、皮膚試驗(yàn)、規(guī)格 IgE）的結(jié)果存在爭(zhēng)議。有關(guān)過(guò)敏特定領(lǐng)域的更多信息，請(qǐng)對(duì)細(xì)胞過(guò)敏進(jìn)行獨(dú)立測(cè)試。

檢測(cè)原理

美德聲CAST® ELISA 是一種基于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）的技術(shù)，用于測(cè)量白細(xì)胞在受到過(guò)敏原刺激后釋放的硫化白三烯（sLT）。測(cè)試過(guò)程包括以下幾個(gè)步驟：

1.       白細(xì)胞分離：患者血液中加入右旋糖酐增加粘度，紅細(xì)胞沉降后，白細(xì)胞和血小板留在血漿中。通過(guò)離心分離白細(xì)胞，并在含有白細(xì)胞介素3（IL-3）的刺激緩沖液中重懸。

2.       細(xì)胞刺激：白細(xì)胞在37°C下孵育40分鐘，以刺激其釋放sLT。刺激后，細(xì)胞通過(guò)離心分離，上清液用于ELISA檢測(cè)。

3.       白三烯測(cè)定：使用預(yù)先包被的多克隆抗小鼠IgG的微孔板進(jìn)行ELISA檢測(cè)。細(xì)胞上清液、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品與酶標(biāo)記的白三烯D4和特異性抗sLT抗體一起孵育。通過(guò)添加底物溶液（pNPP）和停止溶液（2N NaOH）來(lái)測(cè)量吸光度。

試劑供應(yīng)與準(zhǔn)備

·       細(xì)胞分離和刺激試劑：包括右旋糖酐溶液、含有IL-3的刺激緩沖液、抗IgE受體抗體和fMLP的刺激對(duì)照。

·       ELISA試劑：包括預(yù)先包被的微孔板、洗液、ELISA緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品、酶標(biāo)記物、抗體、底物溶液和停止溶液。

樣本采集與儲(chǔ)存

·       樣本要求：建議患者在采集樣本前避免使用抗組胺藥、皮質(zhì)類固醇或色甘酸鈉等抗過(guò)敏藥物。

·       樣本儲(chǔ)存：采集的全血應(yīng)在2-8°C下儲(chǔ)存，避免離心或冷凍。

檢測(cè)程序

1.       標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：通過(guò)系列稀釋標(biāo)準(zhǔn)品制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.       細(xì)胞刺激：根據(jù)樣本量和試劑體積進(jìn)行細(xì)胞刺激。

3.       ELISA程序：包括微孔板的洗滌、標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的添加、酶標(biāo)記物和抗體的孵育、底物溶液的添加以及吸光度的測(cè)量。

結(jié)果計(jì)算

·       標(biāo)準(zhǔn)曲線：通過(guò)測(cè)量每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

·       樣本和對(duì)照：測(cè)量樣本和對(duì)照的吸光度，計(jì)算sLT濃度。

質(zhì)量控制

·       空白吸光度：<200 mOD

·       50%結(jié)合劑量（ED-50）：200-400 pg/mL sLT

·       患者背景：<200 pg/mL sLT

·       刺激對(duì)照：>200 pg/mL sLT

結(jié)果解釋

·       刺激對(duì)照：在過(guò)敏和非過(guò)敏個(gè)體中，刺激對(duì)照的凈刺激產(chǎn)量（扣除背景后）應(yīng)至少為200 pg/mL。

·       過(guò)敏原刺激：對(duì)于吸入性和食物過(guò)敏原，建議凈刺激產(chǎn)量高于200 pg/mL sLT視為陽(yáng)性。

性能特征

·       細(xì)胞刺激動(dòng)力學(xué)：sLT的產(chǎn)生在40分鐘孵育后達(dá)到穩(wěn)定。

·       ELISA精密度：2.5小時(shí)出結(jié)果。

適用范圍

·       臨床應(yīng)用：用于診斷和監(jiān)測(cè)炎癥性疾病，如炎癥性腸?。↖BD）。

·       研究應(yīng)用：用于研究過(guò)敏反應(yīng)和其他炎癥性疾病的發(fā)病機(jī)制。

訂購(gòu)信息

通過(guò)CAST® ELISA，臨床醫(yī)生可以更準(zhǔn)確地診斷和監(jiān)測(cè)炎癥性疾病，從而優(yōu)化患者的治療方案。

我們的用戶

美德聲提供的產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各類臨床實(shí)驗(yàn)室，公共衛(wèi)生中心實(shí)驗(yàn)室，CDC疾病控制中心實(shí)驗(yàn)室等需要高質(zhì)量檢測(cè)單位。

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