BK6015 羥甲基戊二酰fu酶A合成酶試劑盒 三羧酸
- 公司名稱(chēng) 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BK6015
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2025/4/19 17:06:41
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羥甲基戊二酰fu酶A合成酶試劑盒三羧酸循環(huán)系列生化試劑生化與分子生物學(xué)用試劑行業(yè)專(zhuān)用試劑
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BK6015 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 催化乙酰 CoA 與乙酰乙酰CoA 生成羥甲基戊二酰CoA。 |
羥甲基戊二酰fu酶A 合成酶（HMGCS）試劑盒說(shuō)明書(shū)
分光光度法 50 管/48 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：
羥甲基戊二酰fu酶A 合成酶是甲羥戊酸代謝途徑中的關(guān)鍵酶，催化乙酰 CoA 與乙酰乙酰CoA 生成羥甲基戊二酰CoA。
測(cè)定原理：
HMGCS 催化乙酰CoA 與乙酰乙酰CoA 生成羥甲基戊二酰CoA，同時(shí)產(chǎn)生 CoASH，使 DTNB 轉(zhuǎn)化為黃色的TNB，在 412nm 下有特征吸光值。
羥甲基戊二酰fu酶A合成酶試劑盒 三羧酸
組成：
產(chǎn)品名稱(chēng) | BK6015-50T/48S | Storage |
提取液：液體 | 60ml | 4℃ |
試劑一：粉劑 | 1 瓶 | -20℃避光 |
試劑二：粉劑 | 1 瓶 | -20℃避光 |
試劑三：液體 | 15ml | 4℃避光 |
說(shuō)明書(shū) | 一份 | |
試劑一：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存；臨用前加入 7ml 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
試劑二：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存；臨用前加入 7ml 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣本測(cè)定的準(zhǔn)備：
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g 組織，加入1ml 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
測(cè)定步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 412nm，蒸餾水調(diào)零。
2、在 1 ml 玻璃比色皿中加入 125μl 試劑一、125μl 試劑二和 250μl 試劑三，混勻，加入 500μl 樣本上清，迅速混勻后記錄 412nm 下初始吸光值A1 和 4min 后的吸光值A2。計(jì)算ΔA＝A2-A1。
HMGCS 活性計(jì)算：
1、血清（漿）活性
單位定義：每ml 血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生 1nmolTNB 為一個(gè)酶活力單位。
HMGCS（nmol/min /ml）=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷V 樣 ÷T=36.76×ΔA 2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞HMGCS 活性
(1) 按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位定義：每mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1nmolTNB 為一個(gè)酶活力單位。
HMGCS（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=36.76×ΔA÷Cpr
（2） 按樣本鮮重計(jì)算
單位定義：每g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1nmolTNB 為一個(gè)酶活力單位。
HMGCS（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷（W ×V 樣÷V 樣總）÷T=36.76×ΔA÷W
（3） 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
單位定義：每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生 1nmolTNB 為一個(gè)酶活力單位。
HMGCS（nmol/min /104 cel）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷（500×V 樣÷V 樣總）÷T=0.074×ΔA
V 反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：TNB 摩爾消光系數(shù)，1.36×104 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm； V 樣：加入樣本體積，0.5 ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；T：反應(yīng)時(shí)間，4 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì) 濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500 萬(wàn)。
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