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血管緊張素 I (血漿腎素活性)檢測(cè)試劑盒

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供貨周期 一個(gè)月 規(guī)格 96T
貨號(hào) DB52011 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合
主要用途 檢測(cè)PRA(血漿腎素活性)

此試劑盒是科研用途,不屬于醫(yī)療器械

血管緊張素 I (血漿腎素活性)檢測(cè)試劑盒


【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:血管緊張素 I (血漿腎素活性)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

英文名稱:Angiotensin I (PRA) ELISA


【產(chǎn)品規(guī)格】

96T


【預(yù)期用途】

該試劑盒可用于檢測(cè)PRA(血漿腎素活性),檢測(cè)方法是通過測(cè)量單位時(shí)間每體積里產(chǎn)生的血管緊張素-1Ang-1)的質(zhì)量。(ng/ml.h


前言簡(jiǎn)介

測(cè)量PRA值對(duì)于臨床評(píng)估高血壓病人的身體狀況是非常有用的。尤其可用于診斷原發(fā)性醛固酮增多癥(占高血壓患者5-13%)并且?guī)椭委熀凸芾砥渌愋偷母哐獕夯颊?。相比與檢測(cè)腎素濃度,該檢測(cè)方法能更準(zhǔn)確的檢測(cè)原發(fā)性醛固酮增多癥。原因如下:

  1. PRA值是血管緊張素-1的生成率,它是通過腎素的酶促作用,由底物血管緊張素原轉(zhuǎn)變而來。這就在依賴腎素濃度的同時(shí),也需要依賴血管緊張素原的濃度。而這在腎素濃度檢測(cè)中是被忽略掉的。

  2. 在低濃度的情況下,血漿腎素濃度測(cè)試的靈敏度得不到保證。而PRA分析卻可以通過延長生成步驟中的溫育時(shí)間來提高靈敏度。

  3. 當(dāng)抑制劑結(jié)合腎素活性位點(diǎn)時(shí),PRA就會(huì)被抑制。而在有抑制劑的情況下,腎素卻依舊能被相應(yīng)的抗體所識(shí)別出來。因此腎素濃度并不總是和血漿腎素活性相關(guān)。

腎素將血管緊張素原轉(zhuǎn)化為血管緊張素-1,然后大部分1型在肺循環(huán)中被血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>2型。2型血管緊張素能夠通過一系列作用升高血壓:收縮小動(dòng)脈、促進(jìn)鈉的重吸收、刺激腎上腺皮質(zhì)分泌醛固酮。醛固酮同樣也會(huì)影響鈉的代謝并升高動(dòng)脈血壓。

由于血管緊張素-2在血液樣本中非常不穩(wěn)定,因此非常難以準(zhǔn)確地測(cè)量其在循環(huán)

系統(tǒng)中的濃度。但是醛固酮的濃度卻能用IBL公司生產(chǎn)的試劑盒輕松的檢測(cè)出來。


【檢測(cè)原理】

1.生成步驟

采集EDTA血液,分離出血漿。分離出的血漿應(yīng)該在室溫下立即用于檢測(cè),如果不能,需冷凍保存。樣本在采集和未調(diào)節(jié)PH前的處理過程中,不能放在冰上或者在0-10℃間保存。這樣會(huì)導(dǎo)致測(cè)量出的結(jié)果偏高。實(shí)驗(yàn)開始前需加入蛋白酶抑制劑和生成緩沖液,這樣能夠防止血管緊張素-1在血漿中被降解。加入緩沖液后,樣本PH會(huì)在6.0左右。之后把樣本分成兩部分,一部分在0-4℃,另一部分在37℃下準(zhǔn)確溫育90分鐘或者更長時(shí)間,這個(gè)過程中血漿腎素會(huì)催化底物生成血管緊張素-1。把PH調(diào)整到6.5或者7.4。這一步驟非常關(guān)鍵,一旦酸化到PH3.3或者更低再調(diào)回中性就會(huì)造成腎素不可逆的活化;而如果PH大于8.0,那就會(huì)破壞掉腎素。該溫育的過程牽涉到了另一組蛋白酶抑制劑,它能在終止生成反應(yīng)的同時(shí),防止血管緊張素-1被降解成小段的肽鏈。

2.測(cè)量步驟

該檢測(cè)使用競(jìng)爭(zhēng)法,有2個(gè)溫育步驟,總溫育時(shí)間不到2個(gè)小時(shí)。*次溫育時(shí),未標(biāo)記的血管緊張素-1(樣本、標(biāo)準(zhǔn)品以及質(zhì)控品中的)與生物素化的血管緊張素-1競(jìng)爭(zhēng)抗體。鏈霉親和素標(biāo)記的辣根過氧化物酶連結(jié)到固化的生物素-血管緊張素-1上。洗板洗去未結(jié)合的材料。然后加入酶底物液反應(yīng),反應(yīng)一段時(shí)間后加入終止液并測(cè)量吸光值。吸光值大小與樣本中血管緊張素-1濃度成反比。標(biāo)準(zhǔn)品的值可用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,樣本的值可直接在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出。

【試劑盒組成成分

生成緩沖液

1×5ml

含緩沖液和無毒性的抗生素


現(xiàn)配

0.5ml95%乙醇到瓶中,*溶解。使用后冷藏,不用時(shí)請(qǐng)勿開蓋(蛋白酶抑制劑)

微孔板

2×12×8

2個(gè)96孔的微孔板,包被有抗血管緊張素-1抗體、包裝袋中含干燥劑

生物素化A-

1×30ml

緩沖液、蛋白酶抑制劑、生物素化血管緊張素-1、無汞防腐劑

親和素-HRP

1×0.5ml

蛋白緩沖液、親和素-HRP復(fù)合物、無汞防腐劑、檢測(cè)前用分析緩沖液1100稀釋、8小時(shí)穩(wěn)定

標(biāo)準(zhǔn)品

含合成A-Ⅰ多肽、蛋白合成液、無汞防腐劑標(biāo)準(zhǔn)品A 2ml B-H 0.7ml 濃度0、0.2、0.5、1.4、410、25、60ng/ml (體積為近似值,實(shí)際體積請(qǐng)看瓶上標(biāo)簽)

質(zhì)控品

2×0.7ml

含血管緊張素-1、蛋白緩沖液、無汞防腐劑、具體濃度見瓶身標(biāo)簽

分析緩沖液

1×40ml

蛋白緩沖液、無汞防腐劑

洗液濃縮液

2×50ml

10倍濃縮、含緩沖液、非離子型洗滌劑、無汞防腐劑、使用前1:10稀釋

TM底物液

1×32ml

含四甲基聯(lián)苯胺、雙氧水、不含DMFDMSO

終止液

1×12ml

1M硫酸




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