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深圳先進院等在冷凍電鏡技術(shù)領(lǐng)域取得新突破
2021年03月01日 12:05:06 來源:中國科學(xué)院深圳先進技術(shù)研究院 點擊量:5182

近日,中國科學(xué)院深圳先進技術(shù)研究院計算機輔助藥物設(shè)計中心袁曙光課題組與德國馬普生物物理所合作,利用真實細胞膜冷凍電鏡技術(shù),解析了血清素受體5-HT3離子通道的高分辨率三維精細結(jié)構(gòu),并通過生物計算系統(tǒng)闡述了其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子原理。

化工儀器網(wǎng) 科技前沿】近日,中國科學(xué)院深圳先進技術(shù)研究院計算機輔助藥物設(shè)計中心袁曙光課題組與德國馬普生物物理所合作,利用真實細胞膜冷凍電鏡技術(shù),解析了血清素受體5-HT3離子通道的高分辨率三維精細結(jié)構(gòu),并通過生物計算系統(tǒng)闡述了其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子原理。相關(guān)工作以Asymmetric opening of the homopentameric 5-HT3A serotonin receptor in lipid bilayers為題發(fā)表在Nature Communications上。袁曙光研究員和Mikhail Kudryashev研究員為共同通訊作者,德國馬普生物物理所張盈怡博士和Patricia M. Dijkman 博士為共同一作。深圳先進院鄒榮峰博士后和Horst Vogel教授也參與該工作。
 
  該工作首次突破性地證明傳統(tǒng)的人造細胞膜環(huán)境下所解析的冷凍結(jié)構(gòu)與真實細胞膜環(huán)境下的結(jié)構(gòu)差異巨大(主鏈RMSD高達33埃),顛覆傳統(tǒng)人們所認為的在人造細胞膜或者沉淀劑的環(huán)境下所解析的膜蛋白三維結(jié)構(gòu)與其生理狀態(tài)下的結(jié)構(gòu)相同的觀點。此外,通過全原子分子動力學(xué)模擬的方法,團隊發(fā)現(xiàn)激動劑可以正常激活真實細胞膜環(huán)境下所解析的結(jié)構(gòu),而不能激活在人造細胞膜環(huán)境下所解析的結(jié)構(gòu)。這一發(fā)現(xiàn)進一步佐證了人造細胞膜或沉淀劑環(huán)境下所解析的膜蛋白三維結(jié)構(gòu)與真實生理狀態(tài)差異巨大,不一定具有生理活性。
 
  血清素受體(或稱5-羥色胺受體)是在中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的一組G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)和配體門控離子通道(LGIC),位于動物神經(jīng)細胞和其它類型細胞的細胞膜,并介導(dǎo)血清素作為內(nèi)源性配體和廣泛范圍的藥物和致幻藥物的作用。血清素受體可分為七個亞科5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4, 5-HT5, 5-HT6, 5-HT7。其中5-HT3與抑郁癥、嘔吐、止疼等疾病密切相關(guān),是新藥研發(fā)的重要靶點。
 
  本工作首次在真實細胞膜環(huán)境下解析出5-HT3受體的三維精細冷凍電鏡結(jié)構(gòu)(PDB:6Y5A)。其主鏈的RMSD與人造細胞膜環(huán)境下解析的結(jié)構(gòu)差異高達33埃;離子通道半徑差異高達5埃。通過生理狀態(tài)環(huán)境下的全原子分子動力學(xué)模擬發(fā)現(xiàn),在人造細胞膜環(huán)境下解析的結(jié)構(gòu)與激動劑結(jié)合后,不能激活5-HT3受體形成連續(xù)水分子通路,不能激活5-HT3受體行使生理功能和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。而本團隊在真實細胞膜環(huán)境下所解析的結(jié)構(gòu)在相同條件下可以正常激活5-HT3離子通道并行使正常的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。
 
  目前,眾多膜蛋白靶標的三維結(jié)構(gòu)均在人造細胞膜和沉淀劑的環(huán)境下所解析。本工作突破性地在真實細胞膜環(huán)境下解析出重要膜蛋白靶標的三維結(jié)構(gòu),為基于結(jié)構(gòu)的藥物研發(fā)提供了可靠的理論基礎(chǔ),大大減少了新藥研發(fā)的試錯成本。
 
真實細胞膜環(huán)境下的結(jié)構(gòu)與人造細胞膜環(huán)境下5-HT3受體結(jié)構(gòu)與功能的差異
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