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C18反相色譜柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟(jì)和有效的保護(hù)，延長(zhǎng)了色譜柱的壽命，保證分析結(jié)果的重現(xiàn)性。隨著使用時(shí)間的增加，高效液相色譜柱分離效能下降，柱壓增高，其原因主要是由于色譜柱進(jìn)口段的少量填料被污染引起的，而色譜柱整個(gè)柱床并未被破壞，使用保護(hù)柱，相當(dāng)于在色譜柱前增加了一段額外的填料，起到了保護(hù)整個(gè)色譜柱的作用。
反相色譜柱是指利用非極性的反相介質(zhì)為固定相，極性有機(jī)溶劑的水溶液為流動(dòng)相，根據(jù)溶質(zhì)極性(疏水性)的差別進(jìn)行溶質(zhì)分離與純化的洗脫色譜法。與HIC一樣，RPC中溶質(zhì)也通過(guò)疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面*被非極性基團(tuán)所覆蓋，表現(xiàn)出強(qiáng)烈的疏水性。因此，必須用極性有機(jī)溶劑(如甲醇、乙腈等)或其水溶液進(jìn)行溶質(zhì)的洗脫分離。
C18反相色譜柱是一種常見(jiàn)的色譜分離技術(shù)，具有以下優(yōu)勢(shì)：
1、對(duì)極性化合物的分離效果好：反相色譜柱使用非極性固定相，因此對(duì)于極性化合物來(lái)說(shuō)具有較好的分離效果。例如，疏水性蛋白質(zhì)、核酸和多肽可以用反相色譜柱進(jìn)行有效的分離。
2、適用范圍廣：反相色譜柱可以分離各種樣品類(lèi)型，包括藥物、天然產(chǎn)物、化學(xué)物質(zhì)等。同時(shí)，針對(duì)不同的樣品類(lèi)型，也可以選用不同的反相色譜柱進(jìn)行分離。
3、操作簡(jiǎn)便：反相色譜柱通常不需要太復(fù)雜的操作步驟，只需要一些基本的實(shí)驗(yàn)技能就可以進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)。此外，反相色譜柱的固定相具有很高的穩(wěn)定性，可以重復(fù)使用。
4、分離速度快：反相色譜柱具有較高的分離速度，可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成分離實(shí)驗(yàn)。
5、可以進(jìn)行大量自動(dòng)化應(yīng)用：隨著技術(shù)的發(fā)展，反相色譜柱可以與其他分析儀器結(jié)合使用，如質(zhì)譜儀、光譜儀等，實(shí)現(xiàn)高通量分析。同時(shí)，反相色譜柱也可以進(jìn)行自動(dòng)化應(yīng)用，大大提高了實(shí)驗(yàn)效率。
總之，C18反相色譜柱是一種重要的色譜分離技術(shù)，具有廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域和特的優(yōu)勢(shì)。
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